Абстрактный
Фон: Клеточная терапия является потенциальным терапевтическим подходом к нейродегенеративным заболеваниям. Мезенхимальные стволовые клетки, полученные из пуповинной крови человека (hUCB-MSC), являются подходящим источником стволовых клеток для использования в различных клеточных методах лечения.
Цели: В этом исследовании мы рассмотрели подход ПЦР в реальном времени для нейронной дифференцировки hUCB-MSC in vitro.
Материалы и методы: МСК культивировали в среде DMEM с добавлением 10% FBS в уравновешенном увлажненном инкубаторе при 5% CO2 и 37°C. Для нейральной дифференцировки МСК DMEM удаляли и заменяли средой для преиндукции (ретиноевой кислотой). [RA]основной фактор роста фибробластов [bFGF]и эпидермальный фактор роста [EGF]) и базальную среду в течение двух дней. Затем их культивировали в факторе роста нервов (NGF), 3-изобутил-1-метилксантине (IBMX), аскорбиновой кислоте (AA) и основной среде в течение шести дней. Мы также отслеживали экспрессию маркеров нейронной дифференцировки с помощью ПЦР в реальном времени.
Полученные результаты: Результаты ПЦР в реальном времени показали, что экспрессия генов GFAP, MBP и MAP-2 после двухэтапной индукции была значительно повышена по сравнению с обычным протоколом индукции. Кроме того, наше исследование показало, что RA должен играть основную роль в нейральной дифференцировке и судьбе МСК по сравнению с другими нейральными индукторами.
Выводы: Взятые вместе, комбинация химических факторов и факторов роста в двухэтапном протоколе индукции может повысить эффективность дифференцировки МСК в нейральные клетки-предшественники и может стать новым методом простого и быстрого применения МСК в регенеративной медицине в будущем.
