Первое патологоанатомическое исследование человеческих глаз, которым вводили генную терапию на основе AAV2 для LHON

Альфред А. Садун, доктор медицинских наук, и его коллеги провели международное патологоанатомическое исследование человеческих глаз, обработанныхнет–связанный Генная терапия на основе вируса (AAV) 2 для лечения наследственной оптической невропатии Лебера (LHON).

Вывод исследования, по словам первого автора доктора Садуна, заключался в том, что результаты предоставили первое свидетельство успешной трансфекции генов ганглиозных клеток сетчатки. Интересно, что этот эффект наблюдался в обоих глазах пациента, несмотря на одностороннюю инъекцию. Он из Глазного института Доэни, Медицинской школы Калифорнийского университета в Лос-Анджелесе.

Результаты были представлены на ежегодном собрании Американской академии офтальмологии в Сан-Франциско.

Генная терапия AAV2 при LHON

LHON — это наследуемое по материнской линии слепое митохондриальное генетическое заболевание, вызванное мутацией m.11778G>A в НД4 ген. Исследователи объяснили, что лечение генной терапией на основе AAV2 компенсирует мутацию m.11778G>A в пораженных ганглиозных клетках сетчатки.

В обсуждаемое исследование были включены 2 пациента из клинического исследования RESCUE. Пациентам в течение 6 месяцев после двусторонней потери зрения проводилась интравитреальная инъекция ленадогена нолпарвовека (AAV2-НД4) при 9×1010 vg в одном глазу и ложной инъекции в парный глаз.

Исследователи провели посмертный гистопатологический и молекулярный анализ глаз с использованием лазерной микродиссекции сетчатки и капельной цифровой полимеразной цепной реакции.

Пациенты исследования

Пациент 1 — 29-летний мужчина, пациент 2 — 22-летний мужчина. У обоих был LHON, вызванный m.11778G>A. НД4 мутация. Пациент 1 умер в результате острой алкогольной интоксикации, а пациент 2 — от остановки сердца.

У пациента 1 AAV2-НД4 Трансген был распределен в обоих глазах, но преимущественно в правой сетчатке. В неинъецированном глазу обнаружено минимальное количество трансгена (1:200). Через 1 и 2 месяца после лечения в правом глазу отмечалось умеренное внутриглазное воспаление передней камеры и стекловидного тела; через 6 месяцев и 1 год внутриглазного воспаления не наблюдалось. В передней камере содержалось несколько старых пигментированных преципитатов кератита и пигментированных клеток. Через 6 месяцев в правом глазу появилась периодическая пульсация, которая исчезала со сном; в 1 год оба глаза постоянно горели и были светочувствительны.

Исследователи объяснили, что трансген во внутренней половине сетчатки был примерно в 100 раз более сконцентрирован, чем во внешней сетчатке, и наиболее распространен в височной части сетчатки. Трансген не обнаружен в пигментном эпителии сетчатки, сосудистой оболочке и зрительном нерве.

Напротив, у пациента 2 очагов воспаления в сетчатке или диске зрительного нерва обоих глаз не наблюдалось. Через 2 месяца и 1 год после инъекции в левом глазу возникло легкое промежуточное внутриглазное воспаление (без сопутствующего лечения).

Комментируя полученные результаты, авторы отметили: «Эффективность количества ДНК у пациента 2 была значительно выше, чем у пациента 1. Как и у пациента 1, AAV2-НД4 Трансген был обнаружен в сетчатке обоих глаз.

Ключевые моменты, полученные от двух пациентов, заключаются в следующем:

• У пациента 1 наблюдалась лимфоцитарная инфильтрация в височной части сетчатки и особенно вокруг сосудов диска зрительного нерва. ААВ2-НД4 Трансфекция сетчатки была очевидна в инъецированном глазу и обнаруживалась на гораздо более низком уровне в контралатеральном глазу.
• У пациента 2, напротив, не было гистопатологических признаков стойкого воспаления. Однако, как и у пациента 1, AAV2-НД4 Трансген был обнаружен в сетчатке обоих глаз.

«В целом, — заявили исследователи, — это исследование представляет собой первое свидетельство успешной трансфекции генов ганглиозных клеток сетчатки. Интересно, что это произошло в обоих глазах после односторонней инъекции, и дальнейшие эксперименты на перекресте зрительных нервов и других частях мозга пациента 2 продолжаются, чтобы определить путь переноса».

Ссылка

1. Альфредо А. Садун, Нэнси Дж. Ньюман и др. Гистопатологические и молекулярные характеристики в посмертных анализах глаз после генной терапии AAV2 при LHON. Плакат представлен: Американская академия офтальмологии; 3–6 ноября 2023 г.; Сан-Франциско, Калифорния, США.