1754529087
2025-08-07 00:59:00
Новое исследование показывает, что некоторые флавонолы из повседневных продуктов могут закрыть механизм лекарственного средства в организме, потенциально прокладывая путь к более эффективным методам лечения, но клинические препятствия остаются.
Изучать: Ингибирование белка устойчивости к раку молочной железы флавонолами: in vitro, in vivo и в силикоПолем Изображение предоставлено: Данила Максимович / Шаттерсток
В недавнем исследовании, опубликованном в журнале Научные отчетыгруппа исследователей идентифицировала флавонолы, которые ингибируют белок устойчивости к раку молочной железы (BCRP), кодируемые аденозинтрифосфатом (АТФ)-связывающим кассет-подсемейство g Member 2 (ABCG2) и проверяли, обращают ли они лекарственную резистентность in vitro и увеличить экспозицию подложки BCRP напрасноПолем Исследование также подчеркивает важные ограничения и необходимость осторожности при рассмотрении клинических применений.
Фон
Почему некоторые лекарства терпят неудачу, когда пациенты нуждаются в них больше всего? Одной из причин является BCRP, вытоковой насос, управляемый АТФ, который снижает поглощение кишечного препарата, ограничивает проникновение тканей на барьеры, такие как мозг и плацента, и ускоряет элиминацию лекарств, изменяя эффективность и побочные эффекты. Флавоноиды, полученные из диеты, широко потребляются, а некоторые могут блокировать BCRP, но их специфические ингибирующие закономерности и практическое воздействие остаются неясными. Понимание того, какие флавонолы ингибируют BCRP, и насколько сильно важно для реальных проблем, таких как устойчивость к химиотерапии и воздействие статинов. Центральный вопрос: могут ли выбранные флавонолы преодолеть транспортер-опосредованную резистентность и повысить воздействие субстратов BCRP без чрезмерной токсичности? Необходимы дальнейшие исследования, чтобы связать эти механистические результаты с клиническим использованием и прояснить влияние различий в видах и низкую пероральную биодоступность флавонолов, наблюдаемых в этом исследовании.
Об исследовании
Скрининг флавонола проводился в клетках Madin-Darby Canine Dokney II (MDCKII), стабильно экспрессирующих контрольные контроли BCRP и MDCKII-Mock, поддерживаемая в среде Dulbecco, на карболах (DMEM) с FESTAL BOVIN диоксид (Co₂). Активность BCRP определяли количественно с помощью анализа накопления празозина в сбалансированном солевом растворе Hanks (HBSS), буферизованном с 4- (2-гидроксиэтил) -1-пиперазинететесульфоновой кислотой (HEPES). Соединения скринировали при 2 мкМ, и все, что блокировало активность более чем на 25%, перемещалось до полуотлажного ингибирующей концентрации (IC50), проходящего более 0-30 мкм. Диметилсульфоксид (ДМСО) при ≤1% был новичком, с новобиоцином в качестве положительного контроля. После дозирования клетки промывали фосфатно-солевым раствором (PBS), лизировали Triton X-100, а аналиты количественно определяли с помощью высокоэффективной жидкой хроматографии (ВЭЖХ).
Изменение сопротивления проверяли путем воздействия MDCKII-BCRP и макетных клеток SN-38 с каждым из 14 мощных флавонолов (5 мкМ). Жизнеспособность измеряли с использованием 3- (4,5-диметилтиазол-2-ил) -2,5-дифенилтетразолия бромида (МТТ) и были рассчитаны значения обратной сгиба (RF) и полумаксимальной цитотоксической концентрации (CC50). Общая обратная складка (RFT) определяется как отношение CC50 в BCRP-эверэкспрессирующих клетках к CC50 в макете (RFT = CC50 BCRP / CC50 Mock) и используется для количественной оценки степени обращения с сопротивлением. Молекулярная стыковка использовала кристаллическую структуру BCRP (банк данных белка (PDB) ID: 6FFC) через CB-Dock2, с взаимодействиями, визуализированными в студии Biovia Discovery и обобщенных ключевых структурно-активных функций.
У крыс Sprague-Dawley (SD) фармакокинетика перорального сульфасалазина (2 мг/кг) измеряли, когда давали отдельно или совместно с 3,4′-диметоксифлавоном или 3,6,3 ‘, 4’-тетраметоксифлавоном (каждые 5 мг/кг). Все процедуры соответствовали руководству Комитета по уходу за животными и использованием животных (IACUC). Концентрации в плазме количественно определяли с помощью масс -спектрометрии жидкой хроматографии -тандема (LC -MS/MS) с использованием положительной ионизации электрораспыления (ESI+) и множественного мониторинга реакции (MRM) с внутренним стандартом (IS). Сообщаемые параметры включали площадь под кривой концентрации в плазме до последнего количественного времени (Auclast), площади экстраполированной в бесконечность (Aucinf), максимальную концентрацию (CMAX), время до максимального (TMAX) и терминальную период полураспада (T½). Использование сульфасалазина в качестве модели субстрата BCRP у крыс позволяет оценить ингибирование транспортера кишечника, хотя он не касается системной устойчивости к химиотерапии напрасноПолем
Важно отметить, что, напрасноБыл протестирован только сульфасалазин (модельный субстрат BCRP), а не химиотерапевтическое препарат. Следовательно, было продемонстрировано изменение устойчивости к химиотерапии флавонолами. in vitroПолем
Результаты исследования
Скрининг показал, что BCRP активно оттолкнул празозин; Накопление празозина упало на 69% в MDCKII-BCRP по сравнению с макетными клетками, в то время как новобиоцин восстанавливает уровни, подтверждая модель. Из 77 флавонолов, протестированных при 2 мкМ, 22 ингибировал BCRP более чем на 25 процентов; Наиболее сильным было 3,4′-диметоксифлавон (62-процентное ингибирование), с несколькими метокси и гидрокси-замещенными аналогами, также активными. Список хитов прогрессировал до определения IC50: 14 флавонолов показали значения IC50 ниже 5 мкм, приведенные 3,4′-диметоксифлавоном (IC50 приблизительно 1,62 мкм) и 3,6,3 ‘, 4’-тетраметоксифлавон (IC50 приблизительно 1,69 мкм).
Функционально, сверхэкспрессия BCRP увеличивала CC50 для SN-38 с 0,634 до 13,5 мкм, что согласуется с транспортер-опосредованной сопротивлением. Добавление избранных флавонолов (5 мкМ) в значительной степени стерто. 3,6,3 ′, 4′-тетраметоксифлавон и ретизин (5-гидрокси-3,7,3 ‘, 4’-тетраметоксифлавон), снижая CC50 в клетках MDCKII-BCRP до мак-подобных уровней, что указывает на почти полную реверс. Другие создали частичное изменение, отраженное в общих значениях обратного сгиба (RFT) в зависимости от структуры.
Молекулярная стыковка поддержала результаты лаборатории. Все 14 мощных ингибиторов сидели в одном и том же кармане BCRP и плотно связаны (аффинность меньше или равна минус 8,5 ккал на моль). Частые контакты включали PI-Stacking с фенилаланином в A432 и B439, а также водородные связи с треонином в A435 и аспарагин в A436. Гидрофобные взаимодействия с валином в B546 и метионином в B549 еще больше стабилизировали комплексы. Добавление гидроксильных групп предпочитало водородную связь (например, кверцетин), в то время как добавление метокси групп предпочитало гидрофобные и пи-алкильные контакты (например, 3,3 ‘, 4′-триметоксифлавон). Сбалансированная схема замен, как и в 3,5,6,7,3 ′, 4’-гексаметоксифлавоне, создала разнообразные и сильные сети взаимодействия.
In vivo, совместная достатка сульфасалазина с флавонолами, увеличивала воздействие. В зависимости от одного сульфасалазина (CMAX приблизительно 80 нг/мл; Auclast приблизительно 183 нг · H/мл), 3,4′-диметоксифлавон, поднятый auclast примерно в 1,79 раз (примерно 327 нг/мл; p Меньше чем 0,05) с модным возвышением CMAX, в то время как 36,3-nteTrave-tetrAVE-lete-tetravone yeTravEn-yeTrave-yeTrave-letravone 3 6-yetravone, в то время как 3 6,3-y-tetravone. CMAX до около 162 нг/мл (р менее 0,001) и Auclast до около 319 нг · ч/мл (р менее 0,05), без изменения терминального периода полураспада. Эти повышения совпадают с ингибированием кишечника BRP, увеличивающей биодоступность пероральной ораль, сценарий, непосредственно относящийся к реальным лекарственным взаимодействиям (например, такими статинами, как розувастатин) и онкологии, когда перевозчик перевозчика может притушить химиотерапию.
Однако концентрации самих флавонолов в плазме были очень низкими после орального дозирования у крыс, что предполагает, что их основным местом действия может быть кишечный тракт, а не системную циркуляцию. Это ограничивает их потенциал для обратной лекарственной устойчивости при раке вне желудочно -кишечного тракта, если их биодоступность не может быть улучшена. Кроме того, существуют значительные различия в видах между транспортерами BCRP человека и крысы, и уровни экспрессии BCRP в тканях могут различаться между видами. Поэтому необходима осторожность при экстраполяции этих результатов непосредственно людям. Для читателей также важно признать, что доклинические модели, хотя и высоко информативны для механизма, не предсказывают эффективность или безопасность у пациентов с людьми.
Аналитически, LC-MS/MS с количественными уровнями в плазме ESI+ и MRM с использованием IS, включающих некоммерческие параметры: auclast и aucinf, cmax, tmax и t½. Эти фармакокинетические термины отражают степень и время присутствия лекарственного (или ингибитора) в плазме крови, что помогает прояснить механизм и величину любого эффекта повышения поглощения.
Выводы
Через in vitroВ в Силикои напрасно Эксперименты, множественные флавонолы ингибировали BCRP, обратную резистентность SN-38 и повышенное воздействие перорального подложки зонда BCRP, что свидетельствует о том, что каркасы, полученные в рационе, могут изменить расположение лекарственного средства и, возможно, реакцию на лечение. Практически, это сигнализирует о двух вещах: возможностях для повышения биодоступности недостаточно поглощенных методов лечения, и предостерегает непреднамеренные взаимодействия с наркотиками. Ключевые ограничения включают низкую пероральную биодоступность флавонолов, видоспецифичные различия и тот факт, что напрасно Изменение устойчивости к химиотерапии не было продемонстрировано. Будущие приоритеты включают улучшение системного воздействия на флавонолы свинца, тестирование транспортных эффектов с клинически используемыми противораковыми агентами, а также подтверждение преимуществ и безопасность у людей, поэтому клиницисты и пациенты могут использовать модуляцию BCRP, а не быть слепой.
Ссылка на журнал:
- Lee, Kr., Kang, MJ., Kim, MJ, IM, Y., Jeong, HC, & Chae, YJ (2025). Ингибирование белка устойчивости к раку молочной железы флавонолами: in vitroВ напраснои в Силико Последствия взаимодействия. SCI Rep. 15. Два: 10.1038/S41598-025-13908-1,
#Флавонолы #обнаруженные #пищевых #продуктах #могут #блокировать #белок #лекарственной #устойчивости #повысить #поглощение #лекарств
По теме
