Эти плацебо-контролируемые лабораторные сравнительные исследования эффективности были проведены Clinvet в Bloemfontein, Южной Африке (исследование 1) и Нью-Йорк, США (исследование 2). Все кошки всегда находились под уходом за лицензированным ветеринаром, и исследования соответствовали всем применимым местным законам, законам штатов и национальным нормам, связанным с гуманной заботой и использованием животных. Все протоколы исследования были одобрены Учебным комитетом по уходу за животными и использованием животных, и все процедуры исследования соответствовали соответствующей Всемирной ассоциации по продвижению ветеринарных паразитологических руководств [22,23,24]Полем
Учебный дизайн
Дизайн исследования, используемый как в исследовании 1, так и в 2, представлена на рис. 1. Пригодность хозяина для C. felis была определена путем заражения кандидатами кошек (n = 24 за исследование) в день -8 (исследование 1) или день -21 (исследование 2) с C. felis (не зараженным D. caninum). Через 24 часа после инфекции были исследованы кошки и сопоставлены, и для каждого исследования были отобраны 20 кошек с наибольшим количеством блох. Кошки были выделены на обработки, комнаты и клетки в соответствии с рандомизированной полной конструкцией блока с блокировкой, основанной на подсчете предварительных блюд. Блоки состояли из двух кошек, причем одна кошка рандомизировала для каждой обработки в блоке. Кошки в одном и том же блоке были рандомизированы до клеток, расположенных рядом друг с другом в каждой комнате. Зарегистрированные кошки были перемещены в их выделенные клетки в течение 8 дней после начала исследования и лечились в день 0 с помощью плацебо или с революцией плюс. Все кошки были заражены 100 (± 5) жизнеспособными, непредвзятыми, взрослыми блохами C. Felis в дни 0, 7, 14, 21 и 30. Кошкам было разрешено участвовать в нормальном поведении по уходу на протяжении всего исследования, чтобы имитировать метод естественной инфекции D. caninum. Живое количество блошей проводилось на 33 -м дне с удалением блох. Все кошки были эвтаназированы на 58 -й день, а некропсии были выполнены для восстановления, идентификации и подсчета D. Caninum Scolices из желудочно -кишечных трактов каждой кошки. Маскировка была достигнута путем разделения функций учебного персонала. Все люди, проводящие наблюдения, проводя полимеразную цепную реакцию (ПЦР); проведение количества Scolex, заражения блохами после лечения и количество блох после лечения; или выполнение общего ухода за кошками было замаскировано для экспериментальных методов лечения.
Рис. 1
Дизайн исследования, используемый в исследовании 1 и 2
Животные
Все кошки, зарегистрированные в этих двух исследованиях, были здоровыми и клинически нормальными, как определено ветеринаром с опытом в практике общей медицины кошек. Все зарегистрированные кошки были подтверждены отрицательными для D. caninum Infections на основе ПЦР -анализа образцов фекалий [25] В течение 14 дней после начала исследования в день 0. В исследовании 1 использовались 12 мужчин и 8 женщин в возрасте 16–113 месяцев и весом 2,8–4,7 кг в день -1. В исследовании 2 использовались десять мужчин и десять женщин в возрасте 8–47 месяцев и весом 2,7–7,7 кг в день -1. Кошки были неповрежденными или кастрированными, ни одна из них не была беременна или кормящих, и все они были однозначно идентифицированы. Все кошки регулярно осуществлялись и ранее вакцинировали по мере необходимости, но ни одному кошку не было лекарства со времен -14 (исследование 1) или день -21 (исследование 2) до конца исследования (если не требовалось сопутствующее лечение для поддержания адекватного ухода). Все кошки были размещены в индивидуальных клетках, так что физический контакт между кошками или передачи блох невозможны, а кошки не перемещались между клетками после дня 0. Кошек получали коммерческую сухой пищи один раз в день, а пресная вода обеспечивалась ad libitum. Общие наблюдения за здоровьем проводились ежедневно для каждой кошки, начинающейся в день -14 (исследование 1) или день -21 (исследование 2) до продолжительности исследования.
Заражение и оценку блох
В исследовании 1 использовался жизнеспособный, не неспособный взрослый C. Felis Bleas из колонии, первоначально полученной из Laboratories PLRS (Корапея, Северная Каролина, США), и обогащенная блохами из Sierra Research Laboratories (Modesto, CA, USA) в 2017 году. В исследовании 2 использовались жизнеспособные, непредокрытые Felis, изначально полученные от Ecto Services, Inc. (Henderson Incerson, INSINE, а также колядочно, и воли, а также колядочно, и воля, а также колядочно, и воля. С блохами из Хендерсона, штат Северная Каролина, в 2022 году. Все блохи были инфицированы в целях исследований с D. caninum, собранными у кошек в этой области либо в Фессалоники, Греции, в 2019 году (исследование 1) или в Оклахоме, США, в 2015 году (исследование 2). После того, как яйца блох вылупляются, полученные личинки подвергаются воздействию прогноттидов и тем самым вынуждены питаться на них. Эти личинки блох были затем перенесены в стандартную среду размножения блох, где им разрешалось завершить цикл развития. Было подтверждено, что блохи инфицированы D. caninum с уровнем инфекции в диапазоне от 23,0% до 53,3% в исследовании 1, а от 6,8% до 20,0% в исследовании 2. И в исследовании 1, и 2, в общей сложности 24 кошки были заражены 100 (± 5) жизнеспособными, непредвзятыми взрослыми (и D. Caninum) C. Felis Fleas для определения пригодности хозяина. Затем, через 1 день после заражения, было подсчитано количество живых блох, присутствующих на каждой кошке, и были удалены блохи, а 20 кошек с самым высоким количеством блох были случайным образом распределены на одну из двух групп лечения, блокированных по количеству фли. После лечения кошки были заражены 100 (± 5) жизнеспособными, несущественными взрослыми и инфицированными блохами в дни 0, 7, 14, 21 и 30. Во время заражения кошки оставались в своих соответствующих клетках. Флакон, содержащий 100 (± 5) блох, был закручен, чтобы сформировать осадку блох, который затем был нанесен на шерсть для волос кошки как можно ближе к коже на месте, дистальному месту лечения. Флакон находился в положении в течение ~ 10 с, чтобы гарантировать, что осадок блохня не была смещена и для облегчения рассеивания блох в шерсть.
Живое количество блошей с удалением блох проводилось на 33 -й день, 72 (± 2) ч после 30 -го дня заражения. Каждый кот был удален из клетки и помещен на дезинфицированную таблицу. Тонкие зубчатые расчесывания блохли использовались для расчесывания всего корпуса кошки, начиная с передней и работающей к задней части и вентральных областях. Любой собранный мех был удален из расчески и отделена, а блохи внутри меха были подсчитаны. Кошки расчесывали не менее 10 минут. Подсчет персонала, проводящих подсчеты, маскировались на назначения лечения и изменяли перчатки между каждой кошкой.
Все кошки были эвтаназированы на 58 -й день. Желудочно -кишечные тракты удаляли и лигировали, чтобы разделить желудок, тонкий кишечник, большой кишечник и конец прямой кишки. Каждое участок был разрезан, и слизистая оболочка наблюдалась макроскопически для присутствия червей, которые были собраны и сохранились. Слизистой слизистой оболочке промывали водой и царапали, с промыванием и соскобами собирали отдельно, промывали через 0,150 мМ. Собранную материал исследовали с использованием стереомикроскопа, и количество сколи было подсчитано и записано.
Лечение и наблюдения
Клинические наблюдения и оценки участка введения были выполнены на всех кошках перед лечением в день 0. Затем все кошки обрабатывали либо плацебо (революционная революция, плюс состава без активных ингредиентов), либо с революцией плюс на минимальной рекомендуемой дозе (6,0 мг/кг селамектин, 1,0 мг/кг сароланер). Дозы рассчитывали с использованием веса тела, зарегистрированного в день -1. Вся доза вводилась в кожу на одном месте, у основания шеи черепной к лопастям. Место введения оценивали через 1 ч (± 15 мин), 3 часа (± 30 мин), 6 (± 1) ч и 24 (± 1) ч после лечения, а также в дни 3, 5 и 58 для косметических изменений (мат, шипая/жесткие волосы, влажность, белые отложения), алопеция, эритема и отек. Клинические наблюдения были завершены через 1 ч (± 15 мин), 3 часа (± 30 мин), 6 (± 1) ч и 24 (± 1) ч после лечения.
Статистический анализ
Адекватная задача была определена как 60% от контрольных кошек, получавших плацебо, поддерживающие ≥ 50 блох после окончательного заражения блохами на 30-й день и 60% контрольных кошек, получавших плацебо ≥ 2 взрослых D. Caninum во время вскрытия. Экспериментальной единицей была отдельная кошка. Число Scolex и количество блох были проанализированы с помощью общей линейной смешанной модели, содержащей фиксированный эффект обработки и случайные эффекты комнаты. Как для количества Scolex, так и для блох, обработки сравнивались, и эффективность рассчитывалась следующим образом: 100 × (контрольное среднее значение – революция плюс среднее)/контрольное среднее значение. Для количества блох, средств, стандартных ошибок, 95% доверительных ограничений, минимумов и максимумов были рассчитаны. Эффективность рассчитывалась с использованием средних значений наименьших квадратов в качестве оценки арифметических средств. Количество Scolex было преобразовано с помощью естественного преобразования логарифма до анализа. Были рассчитаны стандартные ошибки, 95% доверительные ограничения, минимумы и максимумы. Эффективность рассчитывали с использованием средних значений геометрических (обратно трансформированных наименьших квадратов).
2025-08-04 20:14:00
1754338972
#Эффективность #Revolution #кошек #для #профилактики #передачи #дипилидий #caninum #инфицированными #ctenocephalides #felis #Паразиты #векторы
По теме
